Наполнители спермы

В состав наполнителей спермы обычно входят протекторы, такие как яичный желток, молочные белки или сывороточный альбумин крупного рогатого скота, которые защищают сперматозоиды во время охлаждения, замораживания и оттаивания, а также поддерживают необходимую величину pH. Кроме того, они включают криопротекторы, которые уменьшают вероятность повреждения клеток во время замораживания и последующего оттаивания, сахара в качестве источников энергии и антибиотики, предотвращающие рост бактерий. Необходим тщательный анализ спермы, полученной от любого кобеля и предназначенной для замораживания. В процессе криогенного сохранения происходит повреждение сперматозоидов, поэтому при исходно низком содержании половых клеток в полученном материале оно становится еще меньше после замораживания и оттаивания и в результате сперма может оказаться непригодной для искусственного осеменения. Замораживание спермы — сложный и тонкий процесс. Успешность осеменения зависит от жизнеспособности сперматозоидов после размораживания и от правильного соотношения между составом наполнителя, продолжительностью уравновешивания, скоростью замораживания и оттаивания. Методы криопреципитации более подробно описаны в работах Smith, Concannon, Battista и England. Сперму замораживают в форме таблеток, в капиллярах или стеклянных ампулах. Таблетки образуются, когда аликвоты обогащенной и охлажденной спермы по 50-100 мкл помещают в углубления в сухом льде, а затем хранят в перфорированных нейлоновых стаканчиках в жидком азоте. Капилляры из поливинилхлорида объемом 0,25-0,5 мл заполняют охлажденной обогащенной спермой, вводят пузырек воздуха, укупоривают с одного конца ватным тампоном, а с другого порошкообразным ПВХ пирролидоном, затем подвешивают в парах жидкого азота, а после замораживания помещают в жидкий азот.