Агглютинационный тест в пробирках

АТП стал основным серологическим тестом, используемым для проверки наличия антител к В. canis в сыворотках, давших положительную реакцию в БАТС. Как правило, АТП позволяет определить титры Специфических антител к В. canis. Антитела выявляются через 2—4 недели после инфицирования и при сопутствующей бактериемии. Метод надежен, хотя процедура его проведения несколько различается в разных лабораториях. В ходе определения к раствору антигена В. canis Добавляют постепенно уменьшающиеся количества тестируемой сыворотки, чтобы получить различные разведения. Раствор антигена представляет собой суспензию убитых нагреванием и промытых бактерий В. canis. Титр антител 1:200 считается предварительным доказательством активной инфекции. Получена хорошая корреляция между титром 1:200 и выше и обнаружением бруцелл в культуре, полученной из образца крови (Nicoletti, Chase, 1987b). Если антитела определяются, но их титр меньше 1:200, следует провести повторное тестирование по крайней мере через 2 недели. Агглютинационный тест в пробирке с использованием 2-меркаптоэтанола (АТП-МЭ) сходен с АТП, за исключением того, что к раствору антигена добавляется МЭ с целью увеличения специфичности теста. Модифицированный АТП выявляет антитела с запозданием на одну-две недели в сравнении с обычным АТП, но редко дает ложноположительные результаты (Greene, George, 1984, Nicoletti, 1989). Тест с применением иммунодиффузии в агаровом геле (ИДАГ). В некоторых лабораториях антитела к В. canis определяют с помощью ИДАГ, причем в этом тесте используются один или больше антигенов, получаемых разными методами. Тест рекомендуется как вспомогательный для подтверждения диагноза, подозреваемого на основании положительных результатов, полученных в БАТС, БАТПл и АТП. Самый специфичный, но наименее чувствительный вариант проведения ИДАГ основан на использовании антигенного белка, экстрагированного из цитоплазмы В. canis (Zoha, Carmichael, 1987b). В данном варианте тест выявляет антитела через 4-8 недель после возникновения бактериемии, но положительный результат сохраняется не менее 12 месяцев после ее исчезновения, когда результаты других тестов становятся сомнительными. В то же время ИДАГ может дать отрицательный результат на ранней стадии инфицирования, когда другими методами антитела уже определяются (Nicoletti, Chase, 1987b). Однако рассматриваемый тест имеет то преимущество, что позволяет выявить быстрый переход сыворотки из положительной (по наличию специфических антител) в отрицательную при успешном лечении.